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動物傳染病學(實踐)
一、實訓目的
通過本單元課業(yè)訓練指導,以期達到以下實訓目的:(1)培養(yǎng)學生獨立思考和設計的能力。學生實習前查閱相關資料,自己設計實驗。(2)提升動手能力:學生分小組,自己動手開展實驗。(3)提升學生分析問題和解決問題的能力。學生對實驗中遇到的問題自己進行討論和分析,在老師的引導下,尋找解決問題的方案;學生對實驗結果進行認真分析和總結。(4)以四川主要的規(guī)?;B(yǎng)殖動物豬、雞的傳染病的實驗室診斷為例,培養(yǎng)和掌握動物傳染病的實驗室綜合診斷技能。
三、實驗考核要求
(1)教學實習前認真查閱有關資料,然后以組為單位提交一份實驗設計;(2)教師審核和修改實驗設計,與學生商量后確定每組的實驗方案;(3)每組按實驗方案的內容準備實驗材,實驗材料準備完畢方可,進行正式實驗;(4)整個實驗過程,以學生為主,學生自主設計,自己動手,收集整理實驗數(shù)據(jù);
四、實驗內容
1. 豬細菌性病的診斷實踐
1.1.實驗方案的撰寫:查閱文獻,獨立撰寫“豬細菌病的診斷”綜合實驗方案;
1.2.材料的準備:
(1)臨床病料收集:收集臨床發(fā)病豬病料(或病豬),用于分離細菌。
(2)培養(yǎng)基的制備(鮮血培養(yǎng)基、普通培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、TSA培養(yǎng)基等);
1.3.臨床發(fā)病豬的剖檢;
1.4.細菌的培養(yǎng)與鑒定:
(1)病料的接種(用不同的培養(yǎng)基,同時進行心、肝、脾、肺、腎、腸道的細菌接種);
(2)細菌的培養(yǎng)(厭氧、需氧);
(3)細菌的鑒定(培養(yǎng)特性鑒定、染色特性鑒定、16sRNA鑒定、致病性鑒定、耐藥性鑒定,等。)
1.5.實習報告的撰寫:總結實驗結果,分析實驗數(shù)據(jù),討論分析實驗結果,形成綜合的實驗報告
2. 雞病毒病的實驗室診斷實踐
2.1.實驗方案的撰寫:查閱文獻,獨立撰寫“雞呼吸道病毒的分離鑒定”綜合實驗方案;
2.2.材料的準備:
(1)病料收集:收集臨床發(fā)病雞病料(或病雞),用于分離病毒。
(2)雞胚的孵化:購買SPF雞胚,孵化至9-11日齡;
2.3.臨床發(fā)病雞的剖檢;
2.4.病毒的分離與鑒定:
(1)病料的采集(呼吸道疾病一般采集氣管、肺);
(2)病料的處理(研磨、反復凍融、離心、過濾除菌);
(3)病料的雞胚接種(絨毛尿囊腔、絨毛尿囊膜)
(4)病毒的鑒定(培養(yǎng)特性的鑒定如雞胚死亡時間,胚體出血情況,胚體發(fā)育情況、尿囊液顏色的變化等;理化特性的鑒定如血凝性;核酸鑒定:PCR或RT-PCR擴增靶基因、PCR產(chǎn)物的測序、序列比對等
2.5.實習報告的撰寫:總結實驗結果,分析實驗數(shù)據(jù),討論分析實驗結果,形成綜合的實驗報告
五、實習指導書或參考書或參考網(wǎng)站
教材名稱、作者(譯者)、出版社、出版時間
1.《獸醫(yī)傳染病學實驗指導》,陳溥言(南京農(nóng)業(yè)大學)主編,中國農(nóng)業(yè)出版社,2015.
2.《獸醫(yī)微生物學實驗指導》,姚火春(南京農(nóng)業(yè)大學)主編,中國農(nóng)業(yè)出版社,2002.
3.OIE: Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (http:// www.oie.int/en/standard-setting/terrestrial-manual/access-online/)

